Апигенин инструкция по применению

Лакзенова — натуральный растительный комплекс для женщин, рекомендуемый к применению при различных видах мастопатии в составе комплексной терапии заболевания под контролем врача.

Входящие в состав БАД экстракты лекарственных растений и пчелиного маточного молочка представляют собой поликомпонентный, сбалансированный по качественному и количественному составу комплекс.

Особая форма выпуска (раздельное содержание порошка и жидкости) позволяет смешивать активные ингредиенты продукта непосредственно перед применением, что обеспечивает высокую биодоступность, стабильность, оптимальную концентрацию компонентов состава.

Не содержит спирта.

Экстракт семян пажитника сенного. Семена пажитника содержат много антиоксидантных и противовоспалительных соединений. Это стероидные сапонины (диосгенин, диосцин, тигогенин, сапогенин, гитогенин, тигогенин), флавоноиды, слизистые и горькие вещества, эфирное масло, жирное масло, рутин, витамины (А, С и B₁, В₂, фолиевая кислота), незаменимые аминокислоты, в том числе лизин и L-триптофан, фосфор, железо, селен. Пажитник содержит известный фитоэстроген диосгенин, играющий важную роль в лечении поликистоза яичников, мастопатии, кист щитовидной железы, некровоточащих фибромиом, вторичного бесплодия. Диосгенин способствует снижению активности пролиферативных процессов в молочных железах, уменьшению образования соединительнотканного компонента и сужению молочных протоков. Способствует снижению уровня глюкозы и холестерина в крови.

Пчелиное маточное молочко. Продукты пчеловодства часто назначаются женщинам в составе комплексного лечения мастопатии. Клинические исследования доказывают эффективность применения пчелиного маточного молочка при мастопатии, менопаузальном синдроме. Маточное молочко активизирует ферментативный обмен, улучшает тканевое дыхание и трофику тканей; способствует снятию усталости, улучшает сон, аппетит, память и увеличивает трудоспособность.

Увеличивает сопротивляемость организма к инфекциям, повышает жизненный тонус, улучшает самочувствие, улучшает деятельность сердца. Маточное молочко улучшает протекание обменных процессов в организме, снижает уровень сахара в крови. В силу нейромедиаторного действия улучшает кровообращение головного и спинного мозга. Активирует работу парасимпатического отдела вегетативной нервной системы.

Сухой экстракт плодов фенхеля обыкновенного. Экстракт фенхеля обладает успокаивающим, спазмолитическим, антибактериальным действием. Применяется в качестве средства симптоматического лечения мастопатии, мастита, стимулирует лактацию, оказывает мочегонный эффект, нормализует менструальный цикл.

Сухой экстракт цветков ромашки аптечной. Содержит хамазулен и матрицин, обладающие противовоспалительными, седативными и местноанестезирующими свойствами. Хамазулен ослабляет аллергические реакции, активизирует функцию иммунной системы. Апигенин, апиин и герниарин обладают умеренной спазмолитической активностью: расслабляют гладкую мускулатуру и обезболивают при кишечных спазмах, мастопатии. Герниарин производит потогонное действие, что также важно в терапии мастопатии и набухания молочных желез при предменструальном синдроме. Средства, содержащие экстракты ромашки, применяют при болезненной менструации, вульвите, эндоцервиците, вагините, трещинах сосков у кормящих матерей, мастопатии. Настой цветков ромашки применяется при лечении беспокойств и в легких случаях — бессонницы, связанной с нервными расстройствами.

Жидкий экстракт листьев и соцветий козлятника лекарственного (галеги). Галега применяется в качестве потогонного, лактогонного, мочегонного средства. Экспериментально установлено, что галега усиливает выработку молока во время лактации. При мастопатии используется в большей степени потогонный эффект растения. Способствует снижению уровня сахара в крови. Данное действие используется в терапии поликистоза яичников.

Сухой экстракт листьев и цветков мелиссы лекарственной. Широкий спектр терапевтического действия препаратов мелиссы лекарственной обусловлен содержанием различных биологически активных веществ: выраженный седативный эффект описан для цитронеллаля, а спазмолитические свойства — для гераниола и цитронеллола. Для средств на основе экстрактов мелиссы характерно седативное, анксиолитическое (антиневротическое), антидепрессивное, спазмолитическое, иммуномодулирующее, противовирусное, антиаллергическое и антимикробное действие. Обладает потогонным эффектом, в качестве вспомогательного компонента используется в сборах и БАД, применяемых при мастопатии.

УДК 577.2.04

Апигенин ингибирует рост клеток рака молочной железы: роль ERa и HER2/neu

А. М. Щербаков*, О. Е. Андреева

Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина, 115478, Москва, Каширское ш., 24 *E-mаil: [email protected] Поступила в редакцию 18.03.2015

РЕФЕРАТ Фитоэстрогены — соединения растительного происхождения, обладающие эстрогеноподобной активностью. В организме млекопитающих фитоэстрогены связываются с рецепторами эстрогенов (ER) и участвуют в регуляции роста клеток и транскрипции генов. Некоторые фитоэстрогены могут оказывать цитотоксическое и антипролиферативное воздействие на опухолевые клетки. Изучено действие представителей основных групп фитоэстрогенов на клетки рака молочной железы с различным рецепторным статусом, проанализированы молекулярные пути, отвечающие за реализацию антипролиферативного эффекта лидерного соединения. Антипролиферативный эффект высоких доз фитоэстрогенов (апигенина, ге-нистеина, кверцетина, нарингенина) не зависел от статуса рецепторов стероидных гормонов в клетках рака молочной железы. Соединения этого класса проявили сходную эффективность в ER-положительной и ER-отрицательной модели. Наибольшая антипролиферативная активность обнаружена при инкубации клеток рака молочной железы с апигенином, наименьшая — с нарингенином. Апигенин в высоких дозах (50 мкМ) ингибировал активность рецепторов эстрогенов, индуцированную 170-эстрадиолом, и не проявлял эстро-геноподобную активность. Культивирование HER2-положительных клеток линии SKBR3 с апигенином приводит к снижению экспрессии HER2/neu с параллельной деградацией последнего субстрата каспаз -белка PARP. Таким образом, антипролиферативные эффекты высоких доз фитоэстрогенов в клетках рака молочной железы не зависят от рецепторов стероидных гормонов. Среди изученных соединений наиболее перспективным в качестве противоопухолевого средства является апигенин, значительно ингибирующий пролиферацию и вызывающий гибель клеток рака молочной железы, в том числе HER2-положительных. КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА рак молочной железы, рецепторы эстрогенов, фитоэстрогены, HER2/neu.

ВВЕДЕНИЕ

Рак молочной железы — наиболее распространенное онкологическое заболевание среди женщин, занимающее второе место по частоте среди населения России после новообразований кожи [1-4]. Поиск новых потенциальных соединений, останавливающих развитие рака молочной железы, и анализ их воздействия на клетки опухоли — одна из приоритетных задач онкологии. Учитывая важную роль гормонов в развитии опухолей репродуктивной системы, особый интерес вызывают соединения, близкие по структуре к эстрогенам, такие, как фитоэстрогены. Фитоэстрогены — соединения растительного происхождения, имеющие стероидоподобную структуру [5]. Благодаря «гормональным» свойствам фитоэстрогены также называют «пищевыми гормонами». Уникальность фитоэстрогенов заключается в их парадоксальном действии на клетки: при одних условиях они могут тормозить рост опухоли, при других -выполнять функции клеточного протектора [5-7].

Первоначально интерес к исследованию фито-эстрогенов сформировался в результате анализа эпидемиологических данных, свидетельствующих о снижении частоты возникновения опухолей и смертности от онкологических заболеваний в ряде географических районов с высоким потреблением фруктов и овощей [8-10]. Проведенное в Финляндии Кпек и соавт. [8] исследование включало 9959 человек, которых систематически наблюдали с 1967 по 1991 г. и анализировали в этой группе индивидуальное потребление фитоэстрогенов с пищей. За весь период наблюдения выявлено 997 случаев (около 10% от всей выборки) онкологических заболеваний, из которых 151 — рак легкого. Статистический анализ показал, что в группе с высоким потреблением фитоэстрогенов относительный риск возникновения опухолей (всех локализаций) снижается до 0.8 (за 1 условно принят уровень риска в группе с низким потреблением фитоэстрогенов). Наиболее значимые результаты получены при анализе заболеваемости

раком легких — в этом случае в группе с высоким потреблением фитоэстрогенов риск падал до 0.54 [8]. Схожие тенденции обнаружены при обследовании 1031 больной раком яичников и 2411 здоровых доноров в Италии в период с 1992 по 1999 г. [11]. Согласно Rossi и соавт. [11], риск возникновения рака яичников в группе с высоким потреблением флавонолов (в частности, кверцетина) падает до 0.63, а в группе с высоким употреблением пищи, богатой изофлаво-нами (например, генистеином), — до 0.51. Таким образом, эпидемиологические данные доказывают целесообразность увеличения потребления продуктов, богатых фитоэстрогенами, для профилактики онкологической заболеваемости.

Эпидемиологические данные не позволяют точно понять с помощью каких молекулярных механизмов фитоэстрогены воздействуют на опухолевые клетки и/или защищают нормальные клетки от злокачественной трансформации. Именно поэтому в настоящее время проводятся активные поиски основных внутриклеточных мишеней соединений этого класса на моделях in vitro [12-17]. Ключевыми мишенями фитоэстрогенов в опухолевых клетках принято считать рецепторные тирозинкиназы, такие, как EGFR (Epidermal growth factor receptor) [18-20], FGFR2 (Fibroblast growth factor receptor 2) [21], HER2/neu [22], VEGFR3 (Vascular endothelial growth factor receptor 3) [21, 23], PDGFRa,-ß (Platelet-derived growth factor receptor alpha, -beta) [21] и др. Помимо рецепторного аппарата, некоторые представители класса фитоэстрогенов эффективно ингибируют внутриклеточные киназы, участвующие в регуляции пролиферации и выживаемости клеток: PAK3 (p21-activated kinase 3), PI3K (Phosphatidylinositol 3-kinase), Akt, PIM1, Aurora-A, JAK3 (Janus kinase 3) и др. [15, 16, 21]. Широкий спектр потенциальных мишеней фитоэстрогенов делает эти соединения достаточно перспективными для дальнейших экспериментальных и клинических исследований.

Необходим ли рецептор эстрогенов (ER) для реализации антипролиферативного действия фи-тоэстрогенов на опухолевые клетки, изменяется ли гормоноподобный эффект этих соединений при увеличении концентрации? Окончательный ответ на эти вопросы не получен [5, 6, 17]. Целью настоящей работы было исследование действия представителей основных групп фитоэстрогенов на клетки рака молочной железы с различным ре-цепторным статусом, а также анализ молекулярных путей, отвечающих за реализацию антипролифе-ративного и цитотоксического эффекта лидерного соединения. На клеточных линиях рака молочной железы человека мы показали, что антипролифе-ративное воздействие высоких доз фитоэстроге-

нов (апигенин, генистеин, кверцетин, нарингенин) не зависело от статуса рецепторов стероидных гормонов. В экспериментах in vitro обнаружена сходная эффективность соединений этого класса на ER-положительной линии клеток MCF-7 и ER-отрицательной модели SKBR3. Максимальное ан-типролиферативное действие оказывал флавон апигенин, который мы анализировали более подробно в качестве лидерного соединения. Показано, что с увеличением концентрации апигенина с 5 до 50 мкМ в клетках MCF-7 происходит «переключение» с эстрогеноподобных (схожих с действием ^ß-эстрадиола, естественного лиганда ERa) эффектов на антиэстрогеновые (схожие с действием препаратов группы антиэстрогенов): в высокой дозе апигенин препятствовал активирующему действию ^ß-эстрадиола на рецептор эстрогенов. Известно, что для ER-негативных клеток рака молочной железы SKBR3 характерно высокое содержание HER2/neu — одного из ключевых рецепторов, определяющих высокую выживаемость и агрессивность опухолевых клеток [24]. Методом иммуноблотинга показано, что апигенин в дозе более 25 мкМ снижает экспрессию HER2/neu в клетках SKBR3 с параллельной деградацией субстрата эффекторов апопто-за — PARP (poly ADP-ribose polymerase). Среди исследованных соединений наиболее перспективным оказался апигенин, значительно ингибирующий рост клеток рака молочной железы с различным статусом ERa, в том числе HER2-положительных.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

Изучали фитоэстрогены различных групп — апи-генин (флавон), нарингенин (флаванон), генистеин (изофлавон), кверцетин (флавонол). Кверцетин, генистеин и нарингенин приобретены в Sigma-Aldrich (США), апигенин — в Enzo Biochem (США), химическая чистота каждого препарата была не ниже 97%. Химические структуры соединений приведены на рис. 1. Соединения растворяли в диметилсуль-фоксиде в концентрации 50 мМ и хранили растворы до использования при -20°С.

Клетки рака молочной железы человека MCF-7 (ERa+/HER2-) и SKBR3 (ERa-/HER2+) получены из коллекции РОНЦ им. Н.Н. Блохина. Клеточные линии культивировали in vitro в стандартной среде DMEM («Биолот», Россия), содержавшей 10% эмбриональной сыворотки телят (HyClone, США) и ген-тамицин (50 ед./мл, «ПанЭко», Россия) при 37°С, 5% СО2 и относительной влажности 80-90%. Скорость роста клеток определяли с использованием МТТ-теста, основанного на утилизации живыми клетками реагента МТТ (3-[4,5-диметилтиазол-2]-2,5-дифенилтетразолбромида) [25, 26].

он о

Апигенин

Генистеин

.ОН

он

но

Нарингенин

Кверцетин

он о

он о

‘ОН

тивности иммуноблотинга и нормирования результатов использовали антитела к ß-актину (Cell Signaling Technology, США). Детекцию проводили с помощью вторичных антител, конъюгированных с пероксида-зой хрена (Jackson ImmunoResearch, США), в системе для анализа LAS 4000 (GE HealthCare, США). Статистическую обработку данных осуществляли с помощью программы DATAPLOT (США). Во всех случаях статистические критерии считали значимыми при p < 0.05; каждый опыт воспроизводили минимум 3 раза.

НО’

.он

НО’

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

он

Рис. 1. Химические структуры фитоэстрогенов (апигенин, нарингенин, генистеин, кверцетин)

Сравнение цитостатических свойств фитоэстрогенов из различных групп в отношении клеток рака молочной железы: выбор лидерного соединения

На первом этапе исследования оценивали антипро-

Для определения транскрипционной активно- лиферативное действие высоких доз фитоэстроге-

сти ERa клетки трансфицировали плазмидой, со- нов с помощью теста MTT. ERa-позитивные клетки

держащей репортерный ген люциферазы под кон- линии MCF-7 рассевали на культуральные плаш-

тролем элемента, реагирующего на ER (ERE/Luc), ки и через 24 ч добавляли фитоэстрогены апигенин

плазмида была любезно предоставлена George Reid (флавон), нарингенин (флаванон), генистеин (изофла-

(European Molecular Biology Laboratory, Германия) вон), кверцетин (флавонол). Обнаружено, что инкуба-

[27]. Клетки трансфицировали с использованием ция клеток в течение 3 сут с нарингенином практиче-

реагента Metafectene® PRO, следуя рекомендаци- ски не вызывает антипролиферативных эффектов.

ям производителя (Biontex Laboratories, Германия). Генистеин оказывал большее антипролифератив-

Эффективность и потенциальную токсичность транс- ное действие и в дозе 50 мкМ приводил к снижению

фекции контролировали с помощью котрансфекции на 40% количества живых клеток. Схожую с гени-

клеток плазмидой, содержащей ген ß-галактозидазы. стеином активность проявлял кверцетин — предста-

Активность люциферазы рассчитывали в условных витель группы флавонолов. Наибольший антипро-

единицах (отношение общей активности люцифера- лиферативный эффект оказывал апигенин (рис. 2А)

зы к активности галактозидазы в образцах). в концентрации 50 мкМ (по данным МТТ-теста 20%

Для проведения иммуноблотинга клетки на ста- клеток MCF-7 по сравнению с контролем).

дии 80% монослоя снимали с чашек (60 мм, Corning, Для ответа на вопрос о возможном влиянии экс-

США) в 1 мл фосфатного буфера. Далее для полу- прессии ERa на чувствительность клеток к антипро-

чения суммарного клеточного экстракта к образцам лифератиному действию фитоэстрогенов (в высо-

добавляли по 130 мкл буфера следующего соста- ких концентрациях) использовали ERa-негативную

ва: 50 мM Трис-HCl pH 7.4, 1% SDS (sodium dodecyl клеточную линию SKBR3. Распределение клеток

sulfate), 1% Igepal CA-630, 0.25% дезоксихолат Na, SKBR3 по чувствительности к различным фито-

150 мM NaCl, 1 мM EDTA (ethylenediaminetetraacetic эстрогенам было сходным с распределением ERa-

acid), 1 мM PMSF (phenylmethanesulfonyl fluoride); положительных клеток MCF-7. Наименее токсичным

1 мкг/мл апротинина, лейпептина и пепстатина; 1 мM оказался также нарингенин. Генистеин и кверцетин

ортованадат Na и 1 мM NaF. Суммарные клеточные показали средний антипролиферативный эффект.

экстракты обрабатывали ультразвуком на дезинте- Самой высокой антипролиферативной активностью

граторе SoniPrep 150 Plus (MSE) (пять циклов по 10 с обладал апигенин: в дозе 50 мкМ этот препарат вы-

с амплитудой 3.2) для снижения вязкости раствора. зывал гибель 60% клеток SKBR3 (инкубация 3 сут

Затем образцы клеточных экстрактов центрифуги- с фитоэстрогенами, рис. 2Б). Необходимо отметить,

ровали (10 000 g, 10 мин, +40С, центрифуга Eppendorf что при инкубации клеток с фитоэстрогенами в ука-

5417R, Германия) и проводили стандартный электро- занном диапазоне концентраций (до 50 мкМ) только

форез и иммуноблотинг. Уровень HER2/neu и PARP кверцетин (клетки MCF-7) и апигенин (клетки MCF-7

определяли с помощью первичных антител (Cell и SKBR3) достигают уровня IC50 (таблица). Таким

Signaling Technology, США). Для контроля эффек- образом, нарингенин и генистеин являются достаточ-

л

о4 *

О н

Ш Ц

о

m н

и ф

т

X

с

о

100 80 60 -440 -20 -I-0

1

120

«-S % 100

к,

о 80

т

3 мкМ е л

12 мкМ к о 60

25 мкМ в т

50 мкМ с е ч 40

и

л о 20

m

0

2

3

4

‘3 мкМ ‘ 12 мкМ ’25 мкМ ■50 мкМ

1

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

2

3

4

Рис. 2. Цитостатические свойства фитоэстрогенов в отношении клеток рака молочной железы MCF-7 (А) и SKBR3 (Б). Результаты МТТ-теста, проведенного через 3 сут роста клеток с фитоэстрогенами: 1 — нарингенин, 2 — ге-нистеин, 3 — кверцетин, 4 — апигенин. На диаграмме представлены данные о количестве живых клеток после обработки фитоэстрогенами. За 100% принимали количество контрольных клеток соответствующей клеточной линии. *p < 0.05 — при сравнении с количеством клеток MCF-7, выживших при дозе апигенина 50 мкМ

Определение IC исследованных фитоэстрогенов

Б

IC50, мкМ Нарингенин Генистеин Кверцетин Апигенин

MCF-7 > 50 > 50 50 25

SKBR3 > 50 > 50 > 50 30

но «слабыми» антипролиферативными агентами, их целесообразно тестировать в комбинации с соединениями других классов, например, с антиэстрогенами группы SERM (тамоксифеном и др.) или специфическими ингибиторами тирозинкиназ. Сравнение количества жизнеспособных клеток MCF-7 и SKBR3 после инкубации в течение 3 сут с апигенином в концентрации 50 мкМ показало, что линия SKBR3 более устойчива к цитостатическому действию апигенина, чем MCF-7 (40 и 20% клеток по сравнению с контролем соответственно, р < 0.05). Основываясь на этом наблюдении, мы предположили, что апигенин в высоких дозах может подавлять как сигнальный путь рецептора эстрогенов (важный фактор для роста клеток MCF-7), так и рецепторные тирозинкиназы, в частности HER2/neu (сверхэкспрессия этого рецептора выявлена в клетках SKBR3).

Результаты данной серии опытов позволяют сделать вывод о том, что наибольший антипролифе-ративный эффект среди проанализированных фи-тоэстрогенов оказывает апигенин. В дальнейшем изучали молекулярные механизмы действия высоких доз этого фитоэстрогена на клетки рака молочной железы.

Влияние апигенина на активность рецептора эстрогенов

Тенденции, рассмотренные в предыдущем разделе, свидетельствуют о том, что антипролиферативный эффект фитоэстрогенов в отношении клеток рака молочной железы увеличивается с ростом их концентрации. Важно отметить, что обнаруженный эффект не зависит от гормонального статуса клеток, однако линия MCF-7, в которой экспрессируется ERa, более чувствительна к антипролиферативно-му действию апигенина в высоких дозах (50 мкМ), чем ERa-негативная линия SKBR3. Мы предположили, что с ростом концентрации апигенина происходит «выключение» гормонального компонента в его действии на клетки рака молочной железы. Для проверки этой гипотезы клетки MCF-7 транс-фицировали плазмидой, содержащей репортерную конструкцию с геном люциферазы под контролем эстроген-чувствительного промотора. Затем клетки переводили в среду DМЕМ без фенолового красного («ПанЭко», Россия) и культивировали в течение 24 ч с добавлением 10% бесстероидной эмбриональной сыворотки телят (НуС1опе, США). Активность люциферазы определяли через 7 ч роста клеток

200

180

160

е 140

d 120

100

и

D 80

ER 60

E 40

20

0

1

2

3

4

Рис. 3. Влияние апигенина на активность рецептора эстрогенов, индуцированную 17Р-эстрадиолом. После трансфекции репортерной плазмиды клетки MCF-7 рассевали на 24-луночный планшет и через 24 ч обрабатывали 17Р-эстрадиолом и апигенином (1 — контрольные клетки MCF-7, 2 — 10 нМ 17Р-эстрадиола,

3 — 10 нМ 17Р-эстрадиола и 5 мкМ апигенина,

4 — 10 нМ 17Р-эстрадиола и 50 мкМ апигенина). Активность люциферазы определяли после роста в течение 7 ч с фитоэстрогенами по стандартному протоколу производителя реактивов (Рготеда, США). *р < 0.05 — при сравнении с контрольными клетками; #р < 0.05 — при сравнении столбцов № 4 и № 3

с 17Р-эстрадиолом и апигенином. Как представлено на рис. 3, апигенин в низкой дозе оказывал эстро-геноподобный эффект и усиливал индуцирующее воздействие 17Р-эстрадиола на рецептор эстрогенов. Увеличение концентрации апигенина в 10 раз (до 50 мкМ) приводило к обратному эффекту: фито-эстроген подавлял активность рецептора эстрогенов и препятствовал действию 17Р-эстрадиола. Таким

образом, одним из объяснений цитостатических эффектов высоких (50 мкМ) доз апигенина могут быть его антиэстрогеновые свойства. Полученные данные частично объясняют действие апигенина в клетках MCF-7 — апигенин блокирует основной пролифера-тивный стимул для этой опухолевой линии. Какую «мишень» блокирует апигенин в ERa-негативных клетках рака молочной железы линии SKBR3? Этот вопрос изучали в следующей серии опытов.

Изменение уровня HER2/neu при инкубации клеток рака молочной железы с апигенином

Известно, что в 10-30% случаев рака молочной железы выявляется экспрессия HER2/neu, который рассматривается как маркер плохого прогноза [28, 29]. Нами проанализировано влияние апигенина на экспрессию HER2/neu в клетках SKBR3, продуцирующих этот белок в достаточно большом количестве. Из рис. 4 видно, что в концентрации от 3 до 12 мкМ апигенин не вызывает изменения уровня HER2/neu в клетках SKBR3. Про инкубации клеток с апигени-ном в более высоких дозах (25 и 50 мкМ) обнаружено значительное подавление экспрессии HER2/neu. Иммуноблотинг с антителами к PARP, субстрату эффекторов апоптоза, выявил его частичную деградацию (фиксируется как накопление укороченной формы PARP 89 кДа) при увеличении концентрации апигенина в клетках SKBR3.

Способность фитоэстрогенов снижать содержание HER2/neu в опухолевых клетках была обнаружена Mai и соавт. [30] при инкубации клеточной линии рака молочной железы человека BT-474 (HER2/neu+, ERa+) с генистеином в концентрации 25 мкМ. Кроме того, культивирование клеток BT-474 с генистеином и антиэстрогеном тамоксифе-ном приводило к еще большему снижению экспрессии HER2/neu. Аналогичный эффект наблюдали

Рис. 4. Влияние апиге-нина на экспрессию HER2/neu и деградацию PARP в клетках SKBR3. Клетки SKBR3 обрабатывали в течение 3 сут апигенином в концентрации, указанной на рисунке. Приведены результаты одного из трех независимых опытов

185 кДа HER2/neu

112 кДа PARP 89 кДа

42 кДа Р-актин

12

25

50

Апигенин, мкМ

0

3

6

и для другого представителя семейства рецепторов HER — EGFR (HER1) [30]. Уровень фосфорилиро-вания киназ HER2/neu и EGFR не анализировали, так как биологический эффект генистеина в данном случае определялся именно снижением содержания его белка-мишени (но не его активности). Sakla и соавт. [31] подтвердили данные о снижении уровня HER2/neu [30], а также показали, что даже в низких дозах (1 мкМ) генистеин снижает уровень фосфорилирования HER2/neu в клетках BT-474. Представленные нами данные о снижении уровня HER2/neu в клетках SKBR3 при инкубации с апи-генином согласуются с полученными на другой клеточной модели, линии рака молочной железы MDA-MB-453, результатами [32]. Показано, что фи-тоэстрогены апигенин, лютеолин, нарингенин, эрио-диктиол и хесперетин в высокой дозе (40 мкМ) вызывают деградацию HER2/neu в клетках MDA-MB-453. Обнаружено, что инициация апоптоза при инкубации клеток с апигенином происходит через высвобождение цитохрома с и активацию каспазы 3. Суммируя наши результаты и опубликованные данные, можно заключить, что высокие дозы апигенина снижают экспрессию одной из основных тирозинкиназ, поддерживающих рост HER2-положительных клеток, и параллельно инициируют процессы апоптоза.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Цитотоксические и антипролиферативные свойства фитоэстрогенов в отношении злокачественных клеток активно исследуются в настоящее время [14, 3338]. Интерес к фитоэстрогенам в значительной степени подкреплен природным происхождением этих соединений и относительно низкой себестоимостью синтеза и очистки. Кроме того, получены данные о перспективности использования фитоэстрогенов для профилактики онкологических заболеваний [38, 39]. В нашей работе основное внимание уделено изучению свойств флавона апигенина, проявившего высокую антипролиферативную активность на клетках с различным статусом рецепторов эстрогенов.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Merabishvili V.M. // Voprosy Onkologii. 2013. V. 59. № 3. P. 314-319.

2. DeSantis C.E., Lin C.C., Mariotto A.B., Siegel R.L., Stein K.D., Kramer J.L., Alteri R., Robbins A.S., Jemal A. // CA Cancer J. Clin. 2014. V. 64. № 4. P. 252-271.

3. DeSantis C., Ma J., Bryan L., Jemal A. // CA Cancer J. Clin. 2014. V. 64. № 1. P. 52-62.

4. Злокачественные новообразования в России в 2013 году (заболеваемость и смертность) / Под ред. Каприна А.Д., Старин-ского В.В., Петровой Г.В. М.: МНИОИ им. П.А. Герцена, 2015.

5. Bilal I., Chowdhury A., Davidson J., Whitehead S. // World J. Clin. Oncol. 2014. V. 5. № 4. P. 705-712.

Показано, что в высоких дозах апигенин препятствует активации рецептора эстрогенов 17ß-эстрадиолом, а в HER2-положительных клетках рака молочной железы вызывает подавление экспрессии HER2/neu с параллельной деградацией PARP. В клетках рака молочной железы найдены и другие мишени апи-генина, в том числе белки, поддерживающие рост и выживаемость опухоли: PI3K/Akt [40], STAT3 [33], NF-kB [34], p53 [34, 41], p21 [41], JAK3 [42], ци-клины D1, D3 и Cdk4 [43], VEGF [44]. По-видимому, апигенин является мультитаргетным соединением, запускающим гибель клеток рака молочной железы через ингибирование рецепторных тирозинкиназ, снижение экспрессии факторов роста, активацию p53 и подавление ключевых факторов транскрипции. В 2008 г. в базе данных ClinicalTrials.gov зарегистрировано клиническое исследование второй фазы (NCT00609310) препарата, содержащего 20 мг апиге-нина и 20 мг эпигаллокатехина, у больных колорек-тальным раком. В 2016 г. в рамках этого исследования планируется получить первые сведения об изменении частоты рецидивов заболевания у больных, получавших смесь этих фитоэстрогенов. Другие клинические исследования апигенина (как противоопухолевого средства) в базе ClinicalTrials.gov в настоящий момент не зарегистрированы. Дальнейшее исследование противоопухолевой активности апи-генина и его синтетических производных представляется достаточно перспективным, особенно в отношении HER2-положительных опухолей молочной железы. •

Авторы выражают благодарность М.А. Красильникову за обсуждение результатов экспериментов и текста статьи и George Reid за предоставление плазмиды ERE/LUC.

Работа финансировалась из средств грантов РНФ (№ 14-15-00362, эксперименты раздела № 2) и РФФИ (№ 15-04-02172, эксперименты разделов № 1 и 3).

6. Patisaul H.B., Jefferson W. // Front Neuroendocrinol. 2010. V. 31. № 4. P. 400-419.

7. Bhukhai K., Suksen K., Bhummaphan N., Janjorn K., Thongon N., Tantikanlayaporn D., Piyachaturawat P., Suksamrarn A., Chairoungdua A. // J. Biol. Chem. 2012. V. 287. № 43. P. 36168-36178.

8. Knekt P., Jarvinen R., Seppanen R., Hellovaara M., Teppo L., Pukkala E., Aromaa A. // Am. J. Epidemiol. 1997. V. 146. № 3. P. 223-230.

9. Mourouti N., Panagiotakos D.B. // Maturitas. 2013. V. 76. № 2. P. 118-122.

10. Qu X.L., Fang Y., Zhang M., Zhang Y.Z. // Asian Pac. J. Cancer Prev. 2014. V. 15. № 21. P. 9085-9091.

11. Rossi M., Negri E., Lagiou P., Talamini R., Dal Maso L., Montella M., Franceschi S., La Vecchia C. // Internat. J. Cancer. J. Internat. du Cancer. 2008. V. 123. № 4. P. 895-898.

12. Spoerlein C., Mahal K., Schmidt H., Schobert R. // J. Inorg Biochem. 2013. V. 127. P. 107-115.

13. Harrison M.E., Power Coombs M.R., Delaney L.M., Hoskin D.W. // Exp. Mol. Pathol. 2014. V. 97. № 2. P. 211-217.

14. Bai H., Jin H., Yang F., Zhu H., Cai J. // Scanning. 2014. V. 36. № 6. P. 622-631.

15. Maurya A.K., Vinayak M. // Nutr. Cancer. 2015. V. 67. № 2. P. 354-363.

16. Li S.Z., Qiao S.F., Zhang J.H., Li K. // Anticancer Agents Med. Chem. 2015. V. 15 (Epub ahead of print).

17. Chen F.P., Chien M.H., Chern I.Y. // Climacteric. 2015 (Epub ahead of print).

18. Gruca A., Krawczyk Z., Szeja W., Grynkiewicz G., Rusin A. // Molecules. 2014. V. 19. № 11. P. 18558-18573.

19. Gadgeel S.M., Ali S., Philip P.A., Wozniak A., Sarkar F.H. // Cancer. 2009. V. 115. № 10. P. 2165-2176.

20. Firdous A.B., Sharmila G., Balakrishnan S., RajaSingh P., Suganya S., Srinivasan N., Arunakaran J. // Food Funct. 2014. V. 5. № 10. P. 2632-2645.

21. Boly R., Gras T., Lamkami T., Guissou P., Serteyn D., Kiss R., Dubois J. // Internat. J. Oncol. 2011. V. 38. № 3. P. 833-842.

22. Huang C., Lee S.Y., Lin C.L., Tu T.H., Chen L.H., Chen Y.J., Huang H.C. // J. Agric. Food Chem. 2013. V. 61. № 26. P. 6430-6445.

23. Yu Z.J., He L.Y., Chen Y., Wu M.Y., Zhao X.H., Wang Z.Y. // Xi Bao Yu Fen Zi Mian Yi Xue Za Zhi. 2009. V. 25. № 8. P. 678-680.

24. Longva K.E., Pedersen N.M., Haslekas C., Stang E., Madshus I.H. // Int. J. Cancer. 2005. V. 116. № 3. P. 359-367.

25. Iselt M., Holtei W., Hilgard P. // Arzneimittelforschung. 1989. V. 39. № 7. P. 747-749.

26. Merlin J.L., Azzi S., Lignon D., Ramacci C., Zeghari N., Guillemin F. // Eur. J. Cancer. 1992. V. 28A. № 8-9. P. 14521458.

27. Reid G., Hubner M.R., Metivier R., Brand H., Denger S.,

Manu D., Beaudouin J., Ellenberg J., Gannon F. // Mol. Cell. 2003. V. 11. № 3. P. 695-707.

28. Brufsky A.M. // Breast Cancer (Auckl). 2014. V. 8. P. 109-118.

29. Carey L.A., Perou C.M., Livasy C.A., Dressler L.G., Cowan D., Conway K., Karaca G., Troester M.A., Tse C.K., Edmiston S., et al. // JAMA. 2006. V. 295. № 21. P. 2492-2502.

30. Mai Z., Blackburn G.L., Zhou J.R. // Mol. Carcinogenesis. 2007. V. 46. № 7. P. 534-542.

31. Sakla M.S., Shenouda N.S., Ansell P.J., Macdonald R.S., Lubahn D.B. // Endocrine. 2007. V. 32. № 1. P. 69-78.

32. Way T.D., Kao M.C., Lin J.K. // FEBS Lett. 2005. V. 579. № 1. P. 145-152.

33. Seo H.S., Ku J.M., Choi H.S., Woo J.K., Jang B.H., Shin Y.C., Ko S.G. // Anticancer Res. 2014. V. 34. № 6. P. 2869-2882.

34. Seo H.S., Choi H.S., Kim S.R., Choi Y.K., Woo S.M., Shin I., Woo J.K., Park S.Y., Shin Y.C., Ko S.G. // Mol. Cell Biochem.

2012. V. 366. № 1-2. P. 319-334.

35. Sak K. // Pharmacogn. Rev. 2014. V. 8. № 16. P. 122-146.

36. Shukla S., Gupta S. // Pharm. Res. 2010. V. 27. № 6. P. 962978.

37. Bilal I., Chowdhury A., Davidson J., Whitehead S. // World J. Clin. Oncol. 2014. V. 5. № 4. P. 705-712.

38. Kim S.H., Kim C.W., Jeon S.Y., Go R.E., Hwang K.A., Choi K.C. // Lab. Anim. Res. 2014. V. 30. № 4. P. 143-150.

39. Douglas C.C., Johnson S.A., Arjmandi B.H. // Anticancer Agents Med. Chem. 2013. V. 13. № 8. P. 1178-1187.

40. Lee W.J., Chen W.K., Wang C.J., Lin W.L., Tseng T.H. // Toxicol. Appl. Pharmacol. 2008. V. 226. № 2. P. 178-191.

41. Seo H.S., Ju J.H., Jang K., Shin I. // Nutr. Res. 2011. V. 31. № 2. P. 139-146.

42. Ye Q., Kantonen S., Gomez-Cambronero J. // J. Mol. Biol.

2013. V. 425. № 4. P. 755-766.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

43. Way T.D., Kao M.C., Lin J.K. // FEBS Lett. 2005. V. 579. № 1. P. 145-152.

44. Mafuvadze B., Benakanakere I., Hyder S.M. // Menopause. 2010. V. 17. № 5. P. 1055-1063.

Описание

• На рынке с 1988 года
• Продукт прошел лабораторные испытания. Чистота и эффективность сертифицированы сторонней организацией
• 500 мг в 1 порции
• Пищевая добавка
• Произведено в США из ингредиентов со всего мира
• Протестировано на наличие тяжелых металлов
• Производится на предприятии, имеющем действующую регистрацию надлежащей производственной практики (GMP)
• Веганский продукт
• Без глютена
• Протестировано в независимой лаборатории в США

Апигенин — это мощный флавоноид, который помогает бороться с признаками старения и поддерживает многие аспекты здоровья.

Рекомендации по применению

Принимать по 2 капсулы в день во время еды.

Ингредиенты

Гипромеллоза (ГПМЦ).

Не содержит пшеницу., глютена, орехов, сои, кунжут, молочных продуктов, рыбы, моллюсков, яиц, древесных орехов.

Предупреждения

Перед применением проконсультируйтесь с врачом. Не используйте, если вы беременны, кормите грудью или младше 18 лет.

Не принимать, если пленка для защиты от вскрытия повреждена или отсутствует. Хранить в сухом и прохладном месте.

Хранить в недоступном для детей месте.

Отказ от ответственности

Компания «Eco-Herb» всегда стремится придерживаться максимальной точности в изображениях и информации о своей продукции. Однако некоторые изменения, вносимые производителями, касающиеся упаковки или списка ингредиентов, могут потребовать определенного времени до того момента, как они будут опубликованы на сайте. Имейте в виду, что даже несмотря на то, что иногда упаковка товаров может изменяться, это никак не влияет на качество и свежесть продуктов. Мы рекомендуем вам внимательно ознакомиться с данными на упаковке, предупреждениями и инструкциями по использованию продуктов перед их применением и не полагаться исключительно на информацию, представленную на сайте «Eco-Herb».
Обратите внимание, что некоторые из описаний продуктов на нашем сайте выполнены с использованием машинного перевода. Это сделано исключительно для вашего удобства. «Eco-Herb» не гарантирует, что переводы являются полными и безошибочными, и не несет ответственности за ошибки или неточности при переводе.

Производитель: ProHealth Longevity

• 100% оригинальный

• Срок годности: 1 год, 7 месяцев, 1 день

• В продаже начиная с: 07.2023
• Вес отправления: 
  
  0.12 кг
  

• Код товара: PHV-77943
• UPC: 850030779434
• Количество в упаковке: 60
• Размеры:
  10.9 x 10 x 5.6 см
  ,
  0.09 кг

Оплата

Вы можете оплатить ваш заказ в рублях по безналичному расчету (пластиковые карты VISA/MasterCard/МИР). Мы работаем по 100% предоплате.

Доставка

ВНИМАНИЕ:

• Для доставки Почтой России, трек-номер будет работать после прохождения таможенной службы в РФ;
• Для доставки Boxberry, трек-номер будет работать после прохождения таможенной службы в РФ и поступления посылки на склад Boxberry, до этого посылку везет другая ТК.
• Доставка в Крым на данный момент не осуществляется.

Лимит беспошлинного ввоза в РФ — 200 евро на одну посылку.

Описание на русском:

Апигенин, натуральный, из экстракта ромашки, защищает клетки мозга, помогает при стрессах, успокаивает, повышает тестостерон и фертильность, защищает печень, полезен при диабете и воспалениях, 100% чистота, ИЗ ГЕРМАНИИ

Продукт является хитом продаж в Европе! Продукт прошёл сертификацию и аттестацию в Германии!

Уникальная цена + ДОСТАВКА ПО ВСЕМУ МИРУ! Вы покупаете высококачественный продукт от проверенного десятилетиями производителя из Германии!

Особенность продукта:

✅ Состав: апигенин из экстракта ромашки, экстракт чёрного перца, льняная мука, растительная капсула HPMC.

Как принимать: по 1 капсуле в день с 200 мл воды.

В банке: 45 капсул

Способ хранения: хранить можно при комнатной температуре, в сухом месте, вдали от прямых солнечных лучей и источников света.

Преимущества продукта:

✅ — Капсулы с апигенином, высокая дозировка —  200 мг на капсулу. Продукт от VERA получен из 100% растительного источника.

Особенно высокая биодоступность для организма. Мы использовали пиперин из чёрного перца, так как он повышает и ускоряет усвояемость.

— Особенно высокая чистота 98%. Более высокой чистоты продукта нет на рынке, так как это натуральный продукт.

— НЕ содержит таких добавок как стеарат магния, красители, наполнители, искусственные ароматизаторы, соли магния, желатин, глютен, лактоза, ГМО или консерванты.

Почему апигенин так полезен для здоровья?
Он помогает при диабете, так как изменяет транспортер глюкозы, который снижает общий уровень сахара. Вещество также обладает нейропротекторным действием. Глюкопиранозид апигенина (подтип апигенина) помогает увеличивать количество здоровых нейронов. Одновременно с этим, он улучшает работу мозга и может поддерживать хорошее настроение, так как влияет на выработку серотонина и окситоцина. Тем самым подавленное состояние, тревога, депрессия и раздражительность снижаются.

Апигенин помогает снизить воспалительные процессы в организме, так как контролирует иммунный ответ в пораженных областях. Может защищать ткани по всему телу от преждевременного старения благодаря двум различным механизмам: апигенин — это природный полифенол, обладающий противовоспалительными свойствами, а также антиоксидант. Воспаление является одной из основных причин возрастных изменений.

Около 10 процентов тестостерона в организме преобразуется в дигидротестостерон (DHT), сверхмощную форму тестостерона, связанную с увеличением простаты и облысением у мужчин.
Апигенин уменьшает это преобразование. В результате уровень тестостерона в организме будет поддерживать либидо на высоком уровне и поможет нарастить мышечную массу.

Он также повышает общий уровень тестостерона. Это важный аспект для мужчин с дефицитом тестостерона, который может привести к снижению полового влечения, эректильной дисфункции, низкому количеству сперматозоидов и другим состояниям.

Некоторые виды бактерий развили способность «обманывать» современные антибиотики. Исследования показывают, что антиоксидант может обладать так называемой “обратной антибиотической” активностью в отношении некоторых бактерий. Другими словами, он помогает остановить накопление бактериями устойчивости к антибиотикам.

Одна из причин, по которой ромашка может успокаивать людей — содержание большого количество апигенина. Вещество помогает снижать уровень гормона стресса — кортизола. Другой возможный успокаивающий механизм: данный антиоксидант может связываться с рецепторами мозга, которые дают чувство спокойствия.

Флавоноиды очень помогают при диабетической нефропатии (осложнения, связанного с диабетом). А апигенин помогает сделать клетки более чувствительными к инсулину. Благодаря своим противовоспалительным свойствам вещество может также помочь облегчить боль в суставах, поднимать настроение, защищая клетки мозга, а также связи между ними.

Если вы принимаете синтетические препараты на постоянной основе, то важно употреблять продукты  с высоким содержанием апигенина. Антиоксидант защищает чувствительные ткани почек от окислительного стресса и воспаления.

Продукт предназначен для: мужчин и женщин любого возраста

Стандарт: Европейский

Чистота продукта: без нежелательных добавок!

Возрастное ограничение: без ограничений

Ограничение по длительности приёма: без ограничений

Доставка: в любую точку мира с уникальным номером для отслеживания вашего заказа

Качество: Сертификация качества Германии.

Скидка: если вы хотели бы приобрести более 4-х упаковок данного продукта и получить скидку, то напишите нам, пожалуйста, на имейл перед размещением заказа и мы с удовольствием предоставим 5% скидку (даже если товар уже находится в акции).

Почему лучше купить в БиоЯр

мы НАПРЯМУЮ закупаем продукты у европейских производителей. Тем самым вы покупаете ТОЛЬКО качественный и СВЕЖЕИЗГОТОВЛЕННЫЙ продукт ЕВРОПЕЙСКОГО качества, который имеет ПОЛНУЮ ценность и соответствующие сертификаты анализа.

Отличие продуктов в нашем магазине

Некоторые производители делают экспортные (дешевые) варианты своих продуктов, которые имеют более НИЗКОЕ качество. В нашем магазине представлены продукты, которые продаются на ВНУТРЕННЕМ РЫНКЕ ЕВРОПЫ и не имеют каких-либо изменений в составе и качестве исходных продуктов и сырья. Заказывая у нас, вы можете быть на 100% процентов уверенными, что покупаете европейское качество без каких-либо оговорок (как если бы вы сами покупали на территории ЕС).