Фенбендазол для человека инструкция по применению

Описание лекарственного препарата ветеринарного назначения ФЕБТАЛ^® ТАБЛЕТКИ

Контакты для обращений

Фенбендазол-ВБФ 20 %

Категория:
Антигельминтики и противопаразитные препараты

Состав:

В 1 г препарата содержится 200 мг фенбендазола и вспомогательные вещества.

Показание к применению:

Препарат применяют для лечения свиней и птиц при респираторных и желудочно-кишечных заболеваниях бактериальной этиологии, таких как гемофиллезный полисерозит, актинобациллярная плевропневмония, сальмонеллез, колибактериоз, микоплазмоз, пастереллез, и других болезнях, вызванных микроорганизмами, чувствительными к флорфениколу.

Способ введения: орально.

Срок годности:

Срок годности препарата 2 года с даты изготовления при соблюдении условий хранения и транспортирования.

Условия хранения:

Препарат хранят с предосторожностью (список Б) в упаковке производителя, в защищенном от света месте при температуре от плюс 4 °С до плюс 25 °С.

УДК 619:615.37 D0I: 10.31016/1998-8435-2019-13-2-44-49

Изучение иммунотропной активности супрамолекулярного комплекса фенбендазола

Анастасия Ивановна Варламова 12, Каринэ Гегамовна Курочкина 1, Наталия Владимировна Данилевская 2

1 Всероссийский научно-исследовательский институт фундаментальной и прикладной паразитологии животных и растений — филиал Федерального государственного бюджетного научного учреждения «Федеральный научный центр — Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии имени К. И. Скрябина и Я. Р. Коваленко Российской академии наук», 117218, Москва, ул. Б. Черемушкинская, 28, e-mail: [email protected]

2 Московская Государственная Академия Ветеринарной Медицины и Биотехнологии — МВА имени К. И. Скрябина, 109472, г. Москва, ул. Академика Скрябина, д. 23

Поступила в редакцию: 02.04.2019; принята в печать: 23.04.2019

Аннотация

Цель исследований: изучение иммунотоксическихсвойств супрамолекулярного комплекса фенбендазола (СМФ).

Материалы и методы. Изучение иммунотоксических свойств СМФ проводили с применением реакции агглютинации и гиперчувствительности замедленного типа. В каждой опытной группе было по 7-8 мышей линии СВАхС5781/6 массой 16-18 г. СМФ вводили однократно внутрижелудочно в терапевтической дозе 20 мг/кг по действующему веществу, в десятикратной дозе — 200 мг/кг, базовый препарат — фенбендазол задавали в десятикратно увеличенной дозе — 20 мг/кг. Контрольные группы животных получали крахмальный клейстер. Затем мышей иммунизировали интраперитонеально 3%-ной взвесью эритроцитов барана (тест-антиген) и распределили на 8 групп. Влияние препаратов на антителообразование определяли в реакции гемагглютинации, титр антител в сыворотке крови — в микроварианте прямой реакции гемагглютинации с вычислением индекса реакции. Влияние препарата на клеточный иммунитет устанавливали в реакции гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ) кЭБ.

Результаты и обсуждение. Введение испытуемых препаратов не оказало угнетающего влияния на антителогенез у мышей опытных групп: 6,5±0,22; 6,17±0,47 и 7,75±0,25 (1од2) по сравнению с контролем — 7,67±0,21 (1од2). Индексы реакции составили соответственно 0,85; 0,80 и 1,01. Пероральное однократное введение СМФ в терапевтической (20 мг/кг) и в десятикратной терапевтической дозе (200 мг/кг) не оказывало влияния на клеточное звено иммунитета. Сдвиги индекса реакции воспаления у животных составили соответственно 9,05±3,47 и 10,05±2,25%. Введение базового препарата стимулировало реакцию ГЗТ, что проявилось увеличением индекса воспаления (21,06±3,32%) по сравнению с контрольной группой (9,27±3,91%).

Ключевые слова: супрамолекулярный комплекс, фенбендазол, поливинилпирролидон, эритроциты барана, клеточный и гуморальный иммунный ответ, гемагглютинация, гиперчувствительность замедленного типа, мыши.

Для цитирования: Варламова А. И., Курочкина К. Г., Данилевская Н. В. Изучение иммунотропной активности супрамолекулярного комплекса фенбендазола//Российский паразитологический журнал. 2019. Т. 13. № 2. С. 44-49. 001:10.31016/1998-8435-2019-13-2-44-49.

© Варламова А. И., Курочкина К. Г., Данилевская Н. В.

Study of the Immunotropic Activity of the Supramolecular Complex of Fenbendazole

Anastasiya I. varlamova 12, Karine G. Kurochkina 1, Natalia v. Danilevskaya 2

1 All-Russian Scientific Research Institute of Fundamental and Applied Parasitology of Animals and Plants — a branch of Federal State Budgetary Institution of Science «Federal Scientific Center — All-Russian Scientific Research Institute of Experimental Veterinary Medicine named after K. I. Skryabin and Ya. R. Kovalenko of the Russian Academy of Sciences», 28, B. Cheremushkinskaya street, Moscow, Russia, 117218, e-mail: [email protected]

2 Moscow State Academy of Veterinary Medicine and Biotechnology — K. I. Skryabin MBA, 109472, Moscow, Akademika Skryabina str., 23

Received on: 02.04.2019; accepted for printing on: 23.04.2019

abstract

The purpose of the research is to study the immunotoxic properties of the supramolecular complex of fenbendazole (CMF).

Materials and methods. The study of the immunotoxic properties of SMF was performed using the agglutination reaction and delayed-type hypersensitivity. In each experimental group, there were 7-8 CBA x C57BL / 6 mice weighing 16-18 g. The CMF was administered once intragastrically at a therapeutic dose of 20 mg/kg for the active substance, in a tenfold dose — 200 mg/kg, the basic drug — fenbendazol asked in a tenfold dose of 20 mg/kg. Control groups of animals received starch paste. Then the mice were immunized intraperitoneally with a 3 % suspension of sheep erythrocytes (test antigen) and distributed into 8 groups. The effect of drugs on antibody production was determined in the hemagglutination reaction, the antibody titer in the serum in the microvariant of the direct hemagglutination reaction with the calculation of the reaction index. The effect of the drug on cellular immunity was established in a delayed-type hypersensitivity reaction (DTH) to sheep erythrocytes.

Results and discussion. The introduction of the tested drugs had no inhibitory effect on antibody production in mice of the experimental groups: 6.5±0.22; 6.I7±0.47 and 7.75±0.25 (log2) compared with the control — 7.67±0.2I (log2). Reaction indices were respectively 0.85; 0,80 and 1,01. Oral administration of a single CMF in therapeutic (20 mg/kg) and in a tenfold therapeutic dose (200 mg/kg) did not affect the cellular level of immunity. The shifts in the inflammatory response index in animals were 9.05±3.47 and 10.05±2.25% respectively. The introduction of the basic drug stimulated the reaction of HRT, which was manifested by an increase in the inflammation index (21.06±3.32%) compared with the control group (9.27±3.91%).

keywords: supramolecular complex, fenbendazole, polyvinylpyrrolidone, sheep erythrocytes, cellular and humoral immune response, hemagglutination, delayed-type hypersensitivity, mice.

For citation: Varlamova A. I., Kurochkina K. G., Danilevskaya N. V. Study of the immunotropic activity of the supramolecular complex of fenbendazole. Rossiyskiy parazitologicheskiy zhurnal = Russian Journal of Parasitology. 2019; 13 (2): 44-49. DOI: 10.31016/1998-8435-2019-13-2-44-49.

Введение

Супрамолекулярный комплекс фенбен-дазола с водорастворимым полимером был разработан сотрудниками Института элемен-тоорганических соединений им. Н. А. Несмеянова (ИНЭОС РАН, г. Москва) и ВНИИП — филиал ФГБНУ ФНЦ ВИЭВ РАН с применением механохимической технологии в измельчителях ударно-истирающего типа с регулируемой энергонапряжённостью с целью повышения водорастворимости базового препарата — фенбендазола и, как следствие, улучшения его эффективности при гельминтозах

жвачных животных. В качестве полимера был использован — поливинилпирролидон. ПВП представляет собой полимер винилпирроли-дона с высокой биосовместимостью, который уже длительное время используют в качестве системы доставки плохо растворимых лекарственных средств [10, 12] и для контроля скорости высвобождения лекарственных веществ с целью улучшения параметров их фармакокинетики [11]. Данные физико-химических исследований подтвердили увеличение растворимости полученного комплекса, уменьшение размеров частиц, аморфизацию

субстанции фенбендазола и включение ее в мицеллы ПВП [9]. При оценке параметров острой токсичности установлено, что супра-молекулярный комплекс фенбендазола при энтеральном пути введения белым мышам согласно ГОСТ 12.1.007-76 относится к IV классу малотоксичных веществ [1]. При клиническом испытании СМФ на овцах, спонтанно инвазированных стронгилятами пищеварительного тракта, показал высокую эффективность в дозе 2 мг/кг по ДВ [9].

В связи с тем, что применяемые на практике антигельминтные препараты наряду с терапевтическим действием, могут вызывать изменения в иммунной системе и проявлять иммунотоксические свойства, вызывая дисбаланс в Т- и В-системах иммунитета, что может приводить к дальнейшему снижению резистентности организма [3-6], целью наших исследований было изучение иммунотропной активности супрамолекулярного комплекса фенбендазола. В этом случае эритроциты барана являются тимусзависимым антигеном неинфекционной природы, который обычно используют в иммунологических исследованиях, т.е. препарат вводится в процессе развития специфического иммунного ответа на ЭБ, включающего в себя все этапы иммунного реагирования [2].

Материалы и методы

С целью изучения иммунотоксических свойств СМФ было проведено два опыта на 60 мышах-самцах линии СВАхС57БЬ/6 массой 16-18 г, в ходе которых было установлено влияние СМФ на гуморальный и клеточный иммунный ответ. 14 мышам препарат вводили однократно внутрижелудочно через зонд в терапевтической дозе 20 мг/кг по действующему веществу в 1%-ном крахмальном клейстере, 16 мышам — в десятикратно увеличенной дозе — 200 мг/кг, 14 мышам вводили базовый препарат — фенбендазол в десятикратно увеличенной дозе — 20 мг/кг и 16 мышей служили контролем, и препарат не получали. Затем всех животных (60 гол.) иммунизировали интраперитонеально в объеме 0,5 мл 3%-ной взвеси ЭБ (тест-антиген) в стерильном физиологическом растворе и распределили на 8 групп по 7-8 голов в каждой.

Реакция гемагглютинации. Опыт проводили на 30 мышах линии СВАхС57БЬ/6 массой

16-18 г. После введения испытуемого препарата и иммунизации животных разделили на 4 группы по 7-8 особей в каждой. Титр антител определяли на пике первичного иммунного ответа (7-е сутки после иммунизации) в микроварианте прямой реакции гемагглюти-нации (РГА). Титр антител выражали в виде log2 числа. Для сравнения выраженности иммунного ответа в опыте и контроле определяли индекс действия препарата (ИД), который представляет собой отношение титра антител в опыте к величине титра антител в контроле. Значения индекса 0,5 и ниже говорят об угнетении антителогенеза, а 1,3 и выше — о стимуляции иммунного ответа.

Реакция гиперчувствительности замедленного типа (РГЗТ). Влияние на Т-клеточный иммунитет in vivo оценивают у мышей по реакции ГЗТ к ЭБ. После введения испытуемого препарата и иммунизации животных разделяли на 4 группы по 7-8 особей в каждой. На 5-е сутки для выявления сенсибилизации мышам в подушечку правой задней лапы вводили разрешающую дозу ЭБ — 15%-ную взвесь в объеме 0,02 мл, в контралатеральную лапу вводили физиологический раствор в том же объеме. О степени выраженности воспалительной реакции в месте инъекции разрешающей дозы антигена судили по приросту массы лап через 24 ч. Об интенсивности клеточной реакции ГЗТ судят по величине сдвига индекса реакции по формуле:

ИР = Мо — Мк/Мк х 100 %,

где Мо — масса опытной лапы; Мк — масса контрольной лапы.

Исследования проводили согласно рекомендациям Руководства по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ (2005) [8].

Статистическую обработку полученных данных осуществляли с использованием t-критерия Стьюдента с помощью компьютерной программы STUDENT 200 Microsoft Excel.

Результаты и обсуждение

Изменения в иммунной системе под воздействием фармакологических средств можно установить при использовании модели антигенной стимуляции, т. е. при использовании антигенов различной природы, реакцию

на которые лекарственное средство может изменять. Однократное введение исследуемого препарата одновременно с антигеном (ЭБ) позволяет выявить прямое воздействие на клетки иммунной системы [2, 7]. Реакция прямой гемагглютинации основана на способности агглютининов, содержащихся в сыворотке крови иммунизированных ЭБ животных, «склеивать» ЭБ, используемые для иммунизации. Через 8 сут после иммунизации (7-10 сут — пик выработки антител) у опытных и контрольных животных отбирали пробы крови, готовили сыворотку и тестировали ее в реакции гемагглютинации, используя 1,5%-ную взвесь ЭБ.

При исследовании сывороток крови контрольных животных значения титров антител установлены на уровне 7,67±0,21 (^2) (табл. 1). Пероральное однократное введение испытуемого препарата в терапевтической и десятикратно увеличенной дозах привело к незначительному снижению титра агглютининов в сыворотке крови животных, и они составили соответственно 6,50±0,22; 6,17±0,47 (^2). Введение базового препарата в десятикратной дозе не привело к достоверному изменению титров агглютининов в сыворотке и составило 7,75±0,25 (^2). При этом все индексы реакции — 0,85; 0,80 и 1,01 укладывались в рамки оценки препарата, как не оказывающего отрицательного воздействия на выработку агглютининов.

Изучение действия лекарственных препаратов на клеточное звено иммунного ответа предполагает использование модельных систем, дающих представление о функциональной активности лимфоцитов Т-ряда. К таким тестам и относится реакция ГЗТ. Сенсибилизация организма белковыми антигенами ЭБ вызывает образование антигенспецифиче-ских Т-лимфоцитов. При повторном введении ЭБ (разрешающее введение) на месте введения развивается воспалительная реакция, интенсивность которой можно оценить [2].

Результаты исследования по изучению влияния испытуемого препарата на индукцию ГЗТ приведены в таблице 2.

Как видно из результатов исследования СМФ, введенный мышам перорально однократно в терапевтической (20 мг/кг) и десятикратно увеличенной дозах (200 мг/кг) не оказывал влияния на клеточное звено иммунитета, сдвиги индекса реакции воспаления у животных составили соответственно 9,05±3,47 и 10,05±2,25%, т. е. интенсивность воспалительной реакции была на уровне контрольной группы или незначительно выше.

Базовый препарат в десятикратной дозе оказывал стимулирующее действие на процесс образования Т-лимфоцитов, что проявилось увеличением индекса воспаления 21,06±3,32% по сравнению с контрольной группой 9,27±3,91%.

Таблица 1

Влияние препарата СМФ на антителопродукцию у мышей

Группа Доза препарата, мг/кг Кратность введения Титр антител (log2) Индекс реакции

1 20 Однократно 6,50±0,22 0,85

2 200 Однократно 6,17±0,47 0,80

3 20 Однократно 7,75±0,25 1,01

Контроль — — 7,67±0,21 —

Р < 0,05.

Таблица 2

Реакция гиперчувствительности замедленного типа у мышей при введении препарата СМФ

Группа Доза препарата, мг/кг Кратность введения ИВ, %

1 20 Однократно 9,05±3,47

2 200 Однократно 10,05±2,25

3 20 Однократно 21,06±3,32*

Контроль — 9,27±3,91

* Р > 0,05.

заключение

Таким образом, однократное введение су-прамолекулярного комплекса фенбендазола в терапевтической и десятикратно увеличенной дозах не оказывает угнетающего влияния на антителогенез. Индекс действия препарата составил 0,85 и 0,80, что оценивается как отсутствие отрицательного влияния на гуморальный иммунный ответ. Статистически значимой разницы между результатами оценки влияния испытуемого препарата СМФ на клеточный иммунитет между опытными и контрольными животными также не установлено.

По результатам проведенных исследований можно говорить об отсутствии у супра-молекулярного комплекса фенбендазола им-мунотоксичности в диапазоне испытанных доз и кратности введения.

литература

1. Варламова А. И., Архипов И. А., Данилевская Н. В., Скира В. Н. Острая токсичность супрамолеку-лярных комплексов фенбендазола, полученных по механохимической технологии с использованием адресной доставки Drug Delivery System // Рос. паразитол. Журнал. 2015. Вып. 2. С. 9296.

2. Иванова А.С., Мастернак Т.Б., Мартынов А.И. Принципы изучения иммунотоксического действия фармакологических препаратов // Токсикологический вестник. 2010. № 5 (104). С. 26-31.

3. Колесникова О. П., Смирнов П. И. Испытание иммуноактивных свойств цидектина, аверсек-тина и ивомека на интактных мышах in vitro и в культуре in vitro // Вестник Новосибирского ГАУ 2009. № 10. С. 31-34.

4. Малахова Е. И., Фролова Н. П. Влияние фена-сала и ацемидофена на клеточный и гуморальный иммунитет в эксперименте // Матер. науч. конф. Всес. о-ва гельминтол. М., 1980. Вып. 32. С. 59.

5. Мамыкова О. И. Оценка иммунобиологического статуса животных после дегельминтизации и пути его коррекции: автореф. дис. … канд. вет. наук. М.: ВИГИС, 1989. 21 с.

6. Пономарь С. И. Влияние антигельминтиков в терапевтических дозах на иммунобиологическую реактивность поросят при нематодозах // Бюлл. ВИГИС. 1990. Вып. 43. С. 31-34.

7. Ройт И. Основы иммунологии. М.: Мир, 1991. С. 281-285.

8. Хабриев Р. У. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. М., 2005. С. 501-514.

9. Arkhipov I.A., Khalikov S.S., Sadov K.M., Dushkin A.V., Meteleva E.S., Varlamova A.I., Odoevskaya I.M., Danilevskaya N.V. Influence of mechanochemical technology on anthelmintic efficacy of the supramolecular complex of fenbendazole with polyvinylpyrrolidone. J. Adv. Vet. Anim. Res. 2019. 6(1): 133-141.

10. Le Garrec D., Gori S., Luo L. et al. Poly(N-vinylpyrrolidone)-blockpoly (D,L-lactide) as a new polymeric solubilizer for hydrophobic anticancer drugs: in vitro and in vivo evaluation. J. Control Release. 2004. 99: 83-101. https://doi. org/10.1016/j.jconrel.2004.06.018

11. Lukyanov A. N., Torchilin V P. Micelles from lipid derivatives of water-soluble polymers as delivery systems for poorly soluble drugs. Advanced Drug Delivery Reviews. 56, (9):1273-1289.

12. Rogero S. O., Malmonge S. M., Lugao A. B. et al. Biocompatibility study of polymeric biomaterials. Artif. Organs. 2003; 27: 424-427.

References

1. Varlamova A.I., Arkhipov I.A., Danilevskaya N.V., Skira V.N. Acute toxicity of supramolecular fenbendazole complexes obtained by mechanochemical technology using targeted delivery of the Drug Delivery System. Rossiyskiy parazitologicheskiy zhurnal = Russian Journal of Parasitology. 2015; 2: 92-96. (In Russ.)

2. Ivanova A. S., Masternak T. B., Martynov A. I. Principles of studying the immunotoxic effect of pharmacological preparations. Toxicological Bulletin. 2010; 5 (104): 26-31. (In Russ.)

3. Kolesnikova O. P., Smirnov P. I. Test of immunoactive properties of cidectin, aversectin and ivomek on intact mice in vitro and in vitro culture. Bulletin of the Novosibirsk State Agrarian University. 2009; 10: 31-34. (In Russ.)

4. Malakhova E. I., Frolova N. P. Influence of fenasal and acemidofen on cellular and humoral immunity in the experiment: Materials of reports of the scientific conference of the All-Russian Society of Helminthologists of the Russian Academy of Sciences «Theory and Practice of Fighting Parasitic Diseases». M., 1980; 32: 59. (In Russ.)

5. Mamykova O. I. Evaluation ofthe immunobiological status of animals after deworming and the ways of its correction: avtoref. dis. … Phd. M., 1989; 21. (In Russ.)

6. Ponomar S. I. Effect of anthelmintics in therapeutic doses on immunobiological reactivity of piglets at nematodosis. Bull. VIGIS. 1990; 43: 31-34. (In Russ.)

7. Roit I. Basics of Immunology. M.: Mir, 1991; 281285. (In Russ.)

8. Khabriev R. U. Guidelines for Experimental (Non-Clinical) Study of New Pharmaceutical Ingredients. M., 2005; 832. (In Russ.)

9. Arkhipov I. A., Khalikov S. S., Sadov K. M., Dushkin A. V., Meteleva E. S., Varlamova A. I., Odoevskaya I. M., Danilevskaya N. V. Influence of mechanochemical technology of the supramolecular complex of fenbendazole with

polyvinylpyrrolidone. J. Adv. Vet. Anim. Res. 2019; 6 (1): 133-141.

10. Le Garrec D., Gori S., Luo L. et al. Poly (N-vinylpyrrolidone) -blockpoly (D, L-lactide) as a new polymeric solubilizer for hydrophobic anticancer drugs: in vitro and in vivo evaluation. J. Control Release. 2004. 99: 83-101.

11. Lukyanov A. N., Torchilin V. P. Water-soluble polymers Micelles from lipid. Advanced Drug Delivery Reviews. 56, (9): 1273-1289.

12. Rogero S. O., Malmonge S. M., Lugao A. B. et al. Biocompatibility study of polymeric biomaterials. Artif. Organs. 2003; 27: 424-427.

Фармакология, токсикология
УДК 619:615.015.4
DOI: 10.12737/11778
Поступила в редакцию 19.01.2015
Принята в печать 14.03.2015
Скачать статью в PDF формате
English version

Острая токсичность супрамолекулярных комплексов
фенбендазола, полученных по механохимической технологии с использованием адресной доставки Drug Delivery System

А. И. Варламова¹, И. А. Архипов¹, Н. В. Данилевская², В. Н. Скира^3
1 Всероссийский научно-исследовательский институт фундаментальной и прикладной паразитологии животных и растений им. К. И. Скрябина,
117218, Москва, ул. Б. Черемушкинская, 28, e-mail: arkhipov@vniigis.ru
² Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии им. К. И. Скрябина,
109472, Москва, ул. акад. Скрябина, 23, e-mail: rector@mgavm.ru
³ Федеральное Агентство Научных Организаций
119334, Москва, Ленинский проспект, д. 32а, e-mail: akvet@mail.ru 

Реферат

Цель исследования – изучение острой токсичности супрамолекулярных комплексов фенбендазола, полученных по механохимической технологии в сравнении с субстанцией препарата при введении в желудок белым мышам и крысам.

Материалы и методы. Изучение параметров острой токсичности супрамолекулярных комплексов с фенбендазолом проводили согласно «Руководству по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ» и других правил. Препараты вводили подопытным белым крысам и мышам обоего пола массой тела 160–180 и 18–20 г соответственно однократно в желудок в дозах 7 000, 10 000, 15 000 и 20 000 мг/кг по препарату. Исследование каждой дозы проводили на 6 белых крысах и 10 белых мышах. В течение 14 сут наблюдали за общим состоянием и поведением животных, проявлением симптомов интоксикации и возможной гибелью. Проводили патологоанатомическое вскрытие павших животных. Показатели острой токсичности определяли по Литчфилду и Уилкоксону (М. Д. Беленький, 1963).

Результаты и обсуждение. ЛД₅₀ супрамолекулярного комплекса фенбендазола и базового препарата – фенбендазола установить не удалось из-за низкой токсичности. Максимально переносимая доза супрамолекулярного комплекса № 2 составила 10 000 мг/кг, ЛД₅₀ супрамолекулярного комплекса с фенбендазолом № 2 при введении в желудок белым мышам и крысам – 20 000 мг/кг.

Ключевые слова: супрамолекулярный комплекс, фенбендазол, острая токсичность, белые мыши, белые крысы, ЛД₅₀.

Введение

Для лечения гельминтозов животных широко применяют фенбендазол и его лекарственные формы. Препарат, обладая широким спектром действия, в том числе против нематод, цестод и трематод, успешно используют в ветеринарии на разных видах животных [5–9].

Фенбендазол в химическом отношении представляет собой [5-(фенилтио)-2-бензимидазол карбамат [5]. Механизм действия фенбендазола заключается в ингибировании активности фумарат редуктазы, снижении потребления гликогена в кишечнике гельминтов, нарушении микротубулярной функции и митохондриального метаболизма. Нематоды выделяются из организма животных в течение 2–3-х суток после назначения фенбендазола [9].

Фенбендазол высоко эффективен против нематод, в том числе и на пре имагинальной стадии. Эффективность его против трихоцефал несколько ниже. Препарат снижает зараженность животных имагинальными фасциолами, но не активен против молодых Fasciola hepatica [1].

Фармако-токсикологические свойства фенбендазола достаточно полно изучены и указывают на безопасность применения по общетоксическим свойствам. ЛД₅₀ препарата при введении в желудок белым мышам и крысам установить не удалось, т. е. более 15 000 мг/кг [9]. Недостатком препарата является нерастворимость в воде, что снижает его антигельминтную эффективность.

Согласно системы биофармацевтической классификации FDA [7] фенбендазол относится к IУ классу препаратов с низкой проницаемостью и плохой растворимостью, т. е. препарат имеет слабую биодоступность и плохо абсорбируется слизистой оболочкой кишечника.

Поэтому использование механических, химических подходов, методов комплексообразования типа «гость – хозяин» и приемов нанотехнологии позволит повысить растворимость, проницаемость, биодоступность и эффективность фенбендазола и изменить его токсические свойства.

В связи с этим цель нашей работы – оценить токсические свойства супрамолекулярных комплексов фенбендазола, полученных по механохимической технологии с использованием адресной доставки Drug Delivery System.

Супрамолекулярные комплексы с фенбендазолом № 1 на основе фармакопейного арабиногалактана и № 2 на основе Краснообского арабиногалактана получены методом механохимической технологии д. х. н. В. А. Душкиным, д. т. н. С. С. Халиковым и аспирантом Ю. С. Чистяченко, за что им выражаем благодарность. Способ получения комплексов характеризуется тем, что смешивают фенбендазол с полимером, затем смесь подвергают механохимической обработке путем ударно-истирающих воздействий до образования агрегатов – измельченных частиц размером от 0,1 до 10 микрон. При этом фенбендазол равномерно распределяется в порах и на поверхности полимерного носителя, что способствует повышению растворимости, проницаемости, биодоступности и эффективности.

Материалы и методы

Изучение параметров острой токсичности супрамолекулярных комплексов с фенбендазолом проводили в виварии и на базе лаборатории фармакологии, токсикологии и терапии ВНИИП им. К. И. Скрябина согласно «Руководству по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ» [4], а также других правил [2, 3].

Для определения параметров острой пероральной токсичности исследуемые препараты вводили однократно беспородным белым крысам и мышам обоего пола массой 160–180 и 18–20 г соответственно. Крысам и мышам препарат вводили в дозах 7 000, 10 000, 15 000 и 20 000 мг/кг по препарату. Исследование каждой дозы проводили на 6 белых крысах и 10 белых мышах. В течение 14 сут наблюдали за общим состоянием и поведением животных, проявлением симптомов интоксикации и возможной гибелью. Проводили патологоанатомическое вскрытие павших животных во время эксперимента. Выживших животных по завершению времени наблюдения декапитировали и также подвергали вскрытию.

Результаты и обсуждение

Результаты изучения токсичности препаратов при введении в желудок крысам приведены в таблице 1.

Таблица 1. Показатели токсичности препаратов при введении в желудок

белым крысам

У крыс после введения базового препарата – фенбендазола не отмечали гибели животных после введения в желудок препарата в дозах 7 000, 10 000, 15 000 и 20 000 мг/кг.

Супрамолекулярный комплекс с фенбендазолом № 1 оказался не токсичным. Дозы новой лекарственной формы 7 000, 10 000, 15 000 и 20 000 мг/кг не вызывали гибели животных. От лекарственной формы № 2 пали две крысы, получившие в желудок 15 000 мг/кг, и три крысы пали после дозы 20 000 мг/кг.

Как показали результаты исследований на белых мышах, комплекс № 1 в испытанных дозах  не вызывал гибели мышей (табл. 2). Наиболее токсичным оказался супрамолекулярный комплекс № 2. Только после его введения в желудок в дозе 15 000 мг/кг отмечали гибель трех из 10 мышей, а после дозы 20 000 мг/кг пало 5 из 10 мышей.

Таблица 2. Показатели токсичности препаратов при введении в желудок

белым мышам

Максимально переносимой дозой супрамолекулярного комплекса фенбендазола № 2 является доза 10 000 мг/кг. От максимальной вводимой дозы 20 000 мг/кг пали пять из 10 мышей. ЛД₅₀ этого комплекса следует считать дозу > 20 000 мг/кг.

ЛД₅₀ супрамолекулярного комплекса фенбендазола № 1 рассчитать было невозможно в связи с тем, что от максимально вводимой дозы препарата 20 000 мг/кг не отмечали падежа мышей. Максимально переносимой дозой супрамолекулярного комплекса фенбендазола № 1 можно считать дозу 20 000 мг/кг, не вызывающую падеж и признаков интоксикации организма.

Не токсичным был базовый препарат – фенбендазол, после введения которого в дозе 7 000, 10 000, 15 000 и 20 000 мг/кг не отмечали падежа мышей.

При клиническом наблюдении за животными установлено, что при введении в желудок супрамолекулярного комплекса № 2 в токсических дозах (15 000–20 000 мг/кг) у крыс и мышей в первые часы отмечали одышку, возбуждение, тремор, постепенно переходящие в судороги, которые заканчивались или гибелью животных, или постепенным восстановлением жизненных функций организма животных.

При патологоанатомическом вскрытии павших животных регистрировали гиперемию стенок желудка, двенадцатиперстной кишки и тонкого кишечника; в предсердиях обнаруживали темную не свернувшуюся кровь, на печени и почках точечные кровоизлияния; капсула с почек легко снимается.

Не отмечено выраженной видовой чувствительности супрамолекулярного комплекса № 2. ЛД₅₀ при введении в желудок белым крысам и мышам составила 20 000 мг/кг.

С учетом установленных значений ЛД₅₀ согласно общепринятой гигиенической классификации (ГОСТ 12.1.007-76) супрамолекулярные комплексы с фенбендазолом и базовый препарат – фенбендазол по степени воздействия на организм белых мышей и белых крыс относятся к 4 классу опасности – вещества малоопасные. Таким образом, супрамолекулярный комплекс № 2 оказался более токсичным для организма теплокровных по сравнению с фенбендазолом субстанцией и супрамолекулярным комплексом № 1.

Работа выполнена при финансовой поддержке Российского научного фонда (проект № 14-16-00026).

Литература

1. Архипов И. А. Антигельминтики: фармакология и применение. – М.: Изд-во РАСХН, 2009.-405с.

2. Беленький М. Д. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта. – Л.: Госмедиздат, 1963.- 146с.

3. Правила лабораторной практики. Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации № 708 н от 23.08.2010.

4. Хабриев Р. У. (ред.) Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. – М., 2005. – С. 626–628.

5. Baeder C., Bahr H., Christ O., Duwel D. et al. Fenbendazole: A new, highly effective anthelmintics // Experientia. – 1974. – V. 30. – P. 753–754.

6. Benz G. W. Action of fenbendazole against gastrointestinal nematodes of sheep // Amer. J. Vet. Res. – 1978. – V. 39, No 9. – P. 1107–1108.

7. Biopharmaceutics Classification System (BCS) Guidance, Available at: //www.fda.gov/About FDA/Center Offices/CDER/ucm128219, htm(accessed 25 may 2009).

8. Duwel D. Anthelmintic efficacy of fenbendazole in the control of trematodes and cestodes // Vet. Rec. – 1976. – No 21. – P. 375.

9. Riviere J. E., Papich M. G. Veterinary Pharmacology and Therapeutics. Ninth Edition, Wiley-Blackwell, 2009. -1544 pр.

© 2015 The Author(s). Published by All-Russian Scientific Research Institute of  Fundamental and Applied Parasitology of Animals and Plants named after K.I. Skryabin.
This is an open access article under the Agreement of 02.07.2014 (Russian Science Citation Index (RSCI)) and the Agreemnt of 12/06/2014 (CABI org / Human Sciences section)