Среда пал для листерий инструкция

ИНСТРУКЦИЯ по применению набора реагентов для бактериологических исследований «Питательный агар  для выделения листерий Среда ПАЛ Оболенск

 НАЗНАЧЕНИЕ

Набор реагентов «Питательный агар для выделения листерий (Среда ПАЛ Оболенск)» предназначен для выделения листерий из клинического материала и пищевых продуктов при их бактериологическом исследовании.

1. характеристика 

Набор реагентов состоит из одной банки со средой ПАЛ и 5 флаконов с селективной добавкой (СД).

Среда ПАЛ Оболенск представляет собой мелкодисперсный порошок светло-желтого цвета, который получают смешиванием сухих компонентов. Порошок гигроскопичен, светочувствителен.

СД представляет собой мелкодисперсный порошок розового цвета. Порошок гигроскопичен, светочувствителен.

Среда ПАЛ Оболенск выпускается в полиэтиленовых банках по 250 г, СД во флаконах по 0,045 г.

2.1. Принцип действия

Выделение листерий основано на их способности гидролизовать эскулин с образованием эскулетина, который в присутствии ионов железа образует коричнево-черный комплекс, что приводит к потемнению среды вокруг колоний. Ингибиторы подавляют рост сопутствующей микрофлоры.

2.2. Состав

Среда ПАЛ Оболенск, г/л:

Состав СД, г/л:

1. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ

Набор реагентов обеспечивает рост листерий не позднее 48 ч инкубации при температуре (37±1) °С и подавляет рост эшерихий, протеев и стафилококков.

1. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ

При анализе исследуемого материала – соблюдение СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III-IV группы патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней».

1. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ

• Термостат, обеспечивающий температуру 37 °С
• Весы лабораторные 2 класса точности
• Автоклав
• Пипетки стеклянные, позволяющие отбирать объемы жидкости 1 и 2 мл
• Цилиндр стеклянный мерный вместимостью 1000 мл
• Чашки Петри
• Вода дистиллированная
• Колбы
• Воронки стеклянные

1. АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ

Объекты исследований в клинической, санитарной и пищевой микробиологии.

1. Проведение АНАЛИЗа

7.1. Приготовление среды ПАЛ.

Препарат в количестве, указанном на этикетке, тщательно размешивают в 1 л дистиллированной воды, кипятят в течение 3 мин до полного расплавления агара, фильтруют через ватно-марлевый фильтр и стерилизуют в автоклаве при температуре 121 °С в течение 15 мин.

7.1.1 Приготовление среды ПАЛ с селективной добавкой.

Содержимое флакона с селективной добавкой растворяют в 5 мл дистиллированной воды, тщательно перемешивают и  вносят в стерильную, охлажденную до температуры 50-55 °С среду ПАЛ из расчета 5 мл на 1 л среды.

Готовая среда в чашках прозрачная желто-зеленого цвета.

Готовую среду, разлитую в чашки Петри, можно использовать в течение 7 суток при температуре хранения 2-8 °С.

7.2. Взятие, посев исследуемого материала проводят в соответствии с
ГОСТ Р 51921-2002 «Продукты пищевые. Методы выявления и определения бактерий Listeria monocytogenes», МУК 4.2.1122-02 «Организация контроля и методы выявления  бактерий Listeria monocytogenes в пищевых продуктах».

7.3. Исследуемый материал засевают соответственно на две чашки Петри со средой ПАЛ и стерильным шпателем распределяют взвесь по поверхности среды. Инкубируют при температуре (37±1) ° С  не более 48 ч.

1. УЧЕТ И РЕГИСТРАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ

Учет результатов проводят не позднее 48 ч инкубации посевов при температуре (37±1) ° С,  визуально учитывая наличие и характер роста.

Колонии  L. monocytogenes – мелкие, круглые, серо-желтого цвета,  диаметром
0,4-1,2 мм с образованием вокруг колоний черной зоны.

Колонии  L. ivanovi  – мелкие, круглые, серо-желтого цвета,  диаметром 0,2-1,0 мм с образованием вокруг колоний черной зоны.

Для получения достоверных результатов посевы образцов производить не менее чем в трех повторностях.

1. УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ

Набор реагентов необходимо хранить в герметично закрытой упаковке в сухом защищенном от света месте при температуре от 2 до 30 С.

Срок годности набора реагентов: среды ПАЛ – 2 года, СД — не менее срока годности среды. Набор с истекшим сроком годности использованию не подлежит.

Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение настоящей инструкции по применению.

По вопросам, касающимся качества набора реагентов «Питательный агар для выделения листерий (среда ПАЛ)» в течение срока годности следует обращаться в адрес предприятия-изготовителя: 142279 Оболенск, Московская обл., Серпуховский р-н, ФБУН «Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии», тел. (4967) 36-00-20, факс 36-01-16.

Возможен выпуск набора реагентов в комплектации по требованию заказчика

Среда ПАЛ Оболенск

Дифференцирующая способность среды обусловлена использованием 2 индикаторных систем: с эскулином и маннитом. Дифференциально- диагностическая среда, на которой Listeria monocytogenes гидролизует эскулин на эскулетин и глюкозу. Реагируя с цитратом железа, эскулетин образует коричнево-черный комплекс, что приводит к потемнению среды вокруг колоний. Листерии не ферментируют маннит, поэтому сбраживающие маннит энтерококки и стафилококки формируют цветные колонии (от красного до желтого). Микроаэрофильные условия ограничивают рост аэробов, подобных представителям родов Bacillus и Pseudomonas.

Введение в состав среды яичного желтка (2,5%) способствует восстановлению поврежденных клеток. Добавление среды с кровью поверх PALCAM агара позволяет дифференцировать и подсчитать количество гемолитических листерий.

В зависимости от типа анализируемой пробы перед высевом на PALCAM агар должно быть проведено обогащение в том или ином бульоне для селективного обогащения

Состав среды: панкреатический гидролизат рыбной муки, панкреатический гидролизат казеина, натрий хлористый, пептон мясной, дрожжевой экстракт, литий хлористый, эскулин, железо лимонноамиачное зеленое или коричневое, натрий углекислый, натрий хлористый, агар, селективная добавка.

В виде гомогенного сухого, легко растворимого порошка светло-желтого цвета, светочувствителен.
Селективная добавка в виде мелкодисперсного порошка светло-розового цвета, светочувствительный.
Готовая среда желто-зеленого цвета, прозрачна, со слегка опалесцирующей поверхностью, по плотности соответствует 1,3% агаровому гелю.
Кислотность среды: при 25°С водный раствор (6,9% вес/об) имеет рН 7,0 ± 0,2.

Готовая среда пригодна в течение 7 суток при температуре хранения +2…8°С.

Форма выпуска: сухой порошок в полиэтиленовых банках по 250 г, селективная добавка во флаконах по 0,045 г.

Хранить в герметично закрытой упаковке в сухом защищенном от света месте при температуре +2…30°C.

Технические характеристики

Функциональное назначение

Доставка по Москве и России партнерскими службами доставки

• СДЭК,
• ПЭК,
• Деловые линии,
• Байкал-сервис.

Осуществляется после оплаты заказа, стоимость доставки клиент оплачивает при получении.

Информация о стоимости доставки партнёров является справочной и может быть изменена!

Услуги за перевозку груза по России транспортной компанией до ближайшего пункта выдачи или по адресу в вашем городе оплачиваются при получении!

Стоимость и возможность доставки у разных компаний могут отличаться!

Курьерская доставка Дезнэт по Москве (за МКАД по согласованию).

• заказ от 2000 до 2500 рублей — 450 рублей.
• заказ от 2500 рублей — бесплатно.

Обратите внимание, доставка по Москве — до подъезда, подъем не осуществляется!

Самовывоз

ПОЖАЛУЙСТА, НЕ ПОСЕЩАЙТЕ СКЛАД, ЕСЛИ ВАШ ЗАКАЗ НЕ СОГЛАСОВАН!

Адрес

г. Москва, Кавказский бульвар д. 60, стр. 1.

Режим работы склада

Пн-Чт. с 9:00 до 17:00,
Пт. с 9:00 до 16:00,
Сб. с 10:00 до 15:00.

Наличие: под заказ

Описание: Питательный агар для выделения листерий сухой (ПАЛ) предназначен для выделения Listeria spp. из пищевых продуктов, кормов для животных и других объектов при санитарно-бактериологических исследованиях. Не является медицинским изделием. Среда ПАЛ выпускается в полиэтиленовых банках по 250 г, селективная добавка (СД) 1 выпускается в стеклянных флаконах по 0,05 г (на одну банку со средой ПАЛ — 5 флаконов с СД). Среда ПАЛ представляет собой мелкодисперсный, гигроскопичный, светочувствительный порошок светло-желтого цвета, который получают смешиванием сухих компонентов. СД представляет собой мелкодисперсный, гигроскопичный, светочувствительный порошок розоватого цвета.

Состав (г/л): 
Состав среды ПАЛ, г/л:
Панкреатический гидролизат рыбной муки сухой (ПГРМ сухой) …………………….. 7,5
Пептон мясной ……………………………………. 7,5
Панкреатический гидролизат казеина сухой (ПГК сухой)………………………… 10,0
Дрожжевой экстракт …………………………….. 2,0
Литий хлористый ………………………………… 13,0
Эскулин …………………………………………… 0,8
Железо (III) лимонноаммиачное зеленое или железо (III) лимонноаммиачное коричневое ……. 0,5
Натрий хлористый ……………………………….. 3,5
Натрий углекислый ……………………………… 0,2±0,1
Агар бактериологический ……………………….. 11,0±3,0

Состав СД, г/л:
Полимиксина В сульфат 0,01
Налидиксовая кислота 0,025
Акрифлавин 0,01
Цефтазидим 0,005

Температура хранения: от 2 до 30С.
Температура при транспортировке: от 2 до 30С.

Указания по применению:
Приготовление среды ПАЛ
Навеску среды ПАЛ в количестве, указанном на этикетке для приготовления конкретной серии, размешать в 1 л дистиллированной воды, кипятить в течение 3 мин до полного расплавления агара, профильтровать через ватно-марлевый фильтр, разлить в емкости и простерилизовать автоклавированием при температуре 121С в течение 15 мин. Охладить до 45-50С.
Приготовление среды ПАЛ с селективной добавкой
Содержимое флакона с селективной добавкой растворить в 5 мл дистиллированной воды, тщательно перемешать, внести в стерильную, охлажденную среду (из расчета 5 мл/л) и разлить в стерильные чашки Петри. После застывания чашки со средой подсушить. Готовая среда с СД прозрачная желто-зеленого цвета. Проведение анализа образцов допускается осуществлять в течение 7 сут после приготовления среды, при условии ее хранения при температуре 2-8С.
Исследуемый материал, подготовленный согласно соответствующим документам, засеять соответственно на чашки Петри со средой ПАЛ и стерильным шпателем распределить взвесь по поверхности среды. Инкубировать до 48 ч при температуре (37±1)°С.